Lancet ：AAV、LNP递送单碱基编辑器修复肝脏病症，且不产生脱靶效应

长久以来，肾病性疾病一直是后遗症进化的关键问题，无论是社会生活中会尤为常见的红绿色盲，还是后遗症拉丁美洲的王室数个世纪的血友病，这些因遗传缺陷而加剧的性疾病不仅对症状的社会生活引致冲击，还危及着症状的生命安均，格外重要的是，进化已发掘出数千种肾病性疾病，但对其中会的绝大多数仍束手无策。

格外心痛的是，基因一组一组学的兴起使得进化再次认知不育的本质——源于基因一组本身的基因突变。基于此，如果我们需要对这些基因突变的基因一组启动子进行精准的总编，使其去掉正确的双链对，那就可以从根本上彻底治愈这些进化不育。

基于CRISPR管理系统的双链图形化就是一项十分有希望的、可用于不育用药的关键应用。但遗憾的是，一些科学研究说明了，双链图形化具有脱靶震荡，或许会对正常基因一组启动子进行非抗病毒感染的总编。如果不会补救这一问题，双链图形化在进化不育用药中会的应用将未来会。

2021年1月25日，瑞士慕尼黑州政府理工学院、慕尼黑大学以及巴塞尔大学等一组成的联合制作团队在 Nature Biomedical Engineering 杂志上发表了题为：In vivo cytidine base editing of hepatocytes without detectable off-target mutations in RNA and DNA 的科学研究论文。

这项科学研究通过腺就其病毒感染（AAV）和钙纳米基质（LNP）两种寄送载体，分别向肠道肾脏寄送核苷酸双链图形化（CBE），并对其进行均酪氨酸一组和均基因一组一组脱靶修饰的无偏倚统计分析。

科学研究人员发掘出，通过这两种载体寄送的核苷酸双链图形化可以修复致病基因突变，而不会在肝细胞核的RNA和DNA中会产生脱靶基因突变。这一结果赞同了核苷酸双链总编用药肾病肾脏性疾病的可行性研究。

据统计，单双链基因突变%均部已发掘出的进化遗传性疾病的分之一2/3，同时也是许多动植物重要性状变异的遗传基础。因此，开发一种精准且需要极高效充分利用单双链替换的应用就变得尤为重要，华人生物学家刘如谦（Did Liu）领导的科学研究制作团队开发的双链图形化就是为此而生。

核苷酸双链图形化（CBE）正是刘如谦实验室开发的一种双链图形化，它可以充分利用C？G双链对至T？A双链对的并不需要替换。

然而，最近的一些科学研究却说明了核苷酸双链图形化（CBE）可以在细胞核系中会加剧非抗病毒感染的均酪氨酸一组脱靶基因突变，并在诱导的多能干细胞核和两细胞核期体细胞核中会加剧数百个均基因一组一组脱靶基因突变。此外，核苷酸双链图形化（CBE）中会所使用的脱氨酶——rAPOBEC1，其在体内的过传达将或许加剧肠道肾脏发育妨碍和肝细胞核胰脏。

由此看来，分析报告核苷酸双链图形化（CBE）等双链图形化的脱靶震荡以及其他妨碍震荡是十分必要的。

在这项科学研究中会，为了分析报告核苷酸双链图形化（CBE）在体内是否存在脱靶震荡，科学研究制作团队重点科学研究了Pahenu2尿肠道模型，并将SaKKH-CBE3双链总编管理系统通过AVV介导寄送到肠道肾脏中会。紧接着，科学研究制作团队使用RNA核酸（RNA-Seq）对从肠道肾脏中会提取的RNA进行统计分析。

AVV介导的SaKKH-CBE3管理系统的Pahenu2肠道肾脏寄送和脱靶震荡分析报告统计分析

科学研究人员观察到23%的贝克曼总编，但与并在在的对照一组来得，酪氨酸一组仅限于的C→U的彻底改变并不会增加。格外新奇的是，当转染静脉注射的SaKKH-CBE3 mRNA时，虽然与质粒转染来得，核苷酸双链图形化（CBE）传达减少了18倍，但在保留63%的远距离总编的同时，还大大减少了非贝克曼基因突变。

这一结果说明了核苷酸双链图形化（CBE）的过传达或许与极高的非贝克曼总编所部密切就其。

CBE的过传达或许与极高的非贝克曼总编所部密切就其

与此同时，科学研究制作团队还分析报告了AAV介导的SaKKH-CBE3管理系统在进入Pahenu2肠道之后是否会加剧基因一组一组DNA的非贝克曼总编。均基因一组一组核酸（S）统计分析说明了，SaKKH-CBE3管理系统并并未在肠道肾脏中会引入轻微的DNA脱靶基因突变。

SaKKH-CBE3管理系统可以充分利用贝克曼总编总编，且并未引致轻微的RNA和DNA非贝克曼基因突变

除此之外，科学研究制作团队还通过钙纳米基质（LNP）寄送SaKKH-CBE3 mRNA和就其的sgRNA。他们的科学研究结果说明了，在钙纳米基质（LNP）寄送的瞬时传达SaKKH-CBE3管理系统之后，可加剧约21%的抗病毒感染总编并大逆转了Pahenu2肠道的性疾病表现型，同时也不会侦测到均酪氨酸一组和均基因一组一组的脱靶总编。

钙纳米基质（LNP）寄送的总编效所部和安均性结果，不输于腺就其病毒感染（AAV）载体。

通过钙纳米基质(LNP)向肠道肾脏中会寄送SaKKH-CBE3管理系统

综上所述，SaKKH-CBE3管理系统在AAV或LNP介导的肾脏寄送后的传达不仅能有效替换贝克曼基因突变、大逆转Pahenu2肠道的性疾病表现型，还不会对肾脏细胞核中会的RNA和DNA引致更进一步的非抗病毒感染总编。这一发掘出赞同了核苷酸双链图形化（CBE）在用药肾病肾脏性疾病的可行性研究！

原始记事：

Chaolin Huang 1, Lixue Huang 2, Yeming Wang 3,et al.6-month consequences of COVID-19 in patients discharged from hospital: a cohort study.Lancet. 2021 Jan 16;397(10270):220-232. doi: 10.1016/S0140-6736(20)32656-8. Epub 2021 Jan 8.