Nat Neurosci:对小鼠,非进化灵长类动物和进化中功能不同的中间神经元进行病毒操作

2022-02-07 01:18:38 来源:
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大规模的特异性组学术研究正在进一步阐述在特定蛋白质类型之前自已解读与神经元人格结核病就其的等位基因。思考和外科手术这些结核病的工具将只能凋亡和随心所欲特定轴突共通点的工具。因此,在非人类所猩猩和人类所之前认识这些群体已显得至关不可或缺。合并腺就其菌株(rAAVs)是在大脑之前开展等位基因引导的众所周知工具,对特定的轴突族群没有内在的为了让性。控制系统的提升子推测已经通过强制以单蛋白质分辨率开展特异性组和表观生物学学术研究的电子技术的最新发展而得到加速。但对于提升子为了让的搜寻内部空间即使如此很大。为了集之前我们的提升子为了让,创作者为了让专门从事学术研究Scn1a的调节发展趋势,Scn1a是在各不相同轴突族群之前解读的等位基因,其摧毁与严重的病症病就其。融合用于诱导诱导核糖测序(scATAC-seq)数据的单蛋白质测定与跨亚种的序列保守性相融合,创作者在该等位基因附近提名者了十个候选调节序列。创作者确定了三种提升子,共同凋亡解读Scn1a的轴突族群的丰富性。其之前,一种特定的短调节序列能够将菌株解读上限为解读PV的小脑之前间轴突(PV cIN)。

工具:四名成年人(两名男同性恋/两名女性,年龄22-57岁)不感兴趣了一项外科手术,切除术了大脑其组织(颞叶和白海豚体)以外科手术耐药病症。在所有的病例之前,每个自发性都曾不感兴趣过一次格外进一步的手术,置于硬腹腔下和/或深度电极开展颅内出现异常,以确定病症猝死的位置。从白海豚和颞叶收300μm腌渍,在白海豚腌渍之前,菌株的凋亡是接合处亚区。在接种菌株后7~14d对养成的人腌渍开展电生理纪录。将养成的人腌渍移往到纪录过道。对固有腹腔和静电特性开展分析。大鼠分别保持在17.8–26.1℃和30–70%的表征环境温度和潮湿范围内。这些值被密切出现异常和控制在啮齿昆虫聚居过道。从麻省理工学院(MIT)的族群之前得到了一只雌性都是狨猴(6岁左右)。孩童(2岁)雄性猕猴(macacamulatta)来自加州大学巴克利分校的加州国家所猩猩学术研究之前心。在动物模型脑腌渍器(Zivic Instruments)上开展冠状腌渍,并在冰冷的人工结腹腔容器(ACSF)之前组织学V1小脑。经过处理事件后,用作用作Nova-Seq S2 100循环试剂盒(Illumina)开展测序。

结果:在正常或病理发展但会(包括Dret综合征)体检回路茁壮的早期动态的主要妨碍是,在不用作转等位基因昆虫的但会无法转到特定的蛋白质类型。即使替换成复杂的遗传思路,年轻的PV cIN也没法视作靶标。考虑它们的金属量(它们代表所有抑制性cIN的40%)并且出现得比较较晚。格外尤其地说,在本学术研究之前确定的提升子共享了兼具特殊临床意义的轴突族群的会面途径。最明显的是,这些提升剂可以通过等位基因疗法或调节轴突活性而潜在地用于减低Dret综合征的衰弱疼痛。创作者得出结论局部和下半身注射可用于合理的菌株引导到大脑。通过局部注射,可能会改善局灶性病症,PFC神经元性或白海豚记忆妨碍。相比,控制系统性替换成菌株可用于只能全面性干预的但会,例如,纠正普遍性病症猝死或人格失常和神经元继发结核病。创作者的学术研究表明,对调节表达方式的完全符合鉴定为外科手术环境之前特定蛋白质类型的获收共享了路线图。不可或缺的是,得出结论我们的提升子为了让工具可推广到其他等位基因。总体而言,我们推测了三组七个针对各不相同轴突族群和之前枢大脑地带兼具截然各不相同特异性的提升剂。即使替换成了完全符合的标准(对目标群体的为了让性> 90%),我们的工具仍兼具显着的成功率(> 20%)。此外,正如整体保守的序列所预测的那样,创作者的测试的提升可数在包括人类所在内的所有亚种之前被证明兼具同等的为了让性和合理性。

Vormstein-Schneider, D., Lin, J.D., Pelkey, K.A. et al. Viral manipulation of functionally distinct interneurons in mice, non-human primates and humans. Nat Neurosci (2020).

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